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更新時間:2021-02-22 09:31:41
細胞代謝和代謝組學
Joshua D. Rabinowitz, PhD
Department of Chemistry, Princeton University
Princeton, NJ 08544 USA
同位素示蹤劑是代謝研究中重要的工具。為了測定培養哺乳動物細胞內中心碳代謝途徑代謝通量,我們向動物細胞培養基中添加D -葡萄糖(13C6, 99%) (CLM-1396)或L -谷氨酰胺(13C5, 99%) (CLM-1822)。細胞通過在同位素標記的培養基中進行培養,其代謝物可以通過用GC / MS或LC / MS進行檢測。在傳統研究中,葡萄糖通常被認為是許多細胞,特別是癌細胞的主要碳源。然而,最近的研究表明,谷氨酰胺通常在三羧酸(TCA)循環中起主導作用。谷氨酰胺對三羧酸循環中四碳化合物的作用,可以通過對蘋果酸鹽和天門冬氨酸標記來檢測,而對三羧酸循環中二碳化合物的作用可以通過乙酰輔酶A和脂肪酸標記來檢測。檸檬酸是一種信息非常豐富的分子,在三羧酸循環中它對二碳化合物以及四碳化合物都有相關作用。使用質譜等現代化的儀器,可以同時測量所有這些所有同位素標記的化合物,從而實現系統級通量定量。這些方法也可以應用于生物體內環境,在切除腫瘤或其他組織標本之前,給小鼠或患者注入同位素標記的營養素。代謝在生物工程和疾病病理生理學中具有非常總要的意思,也使得同位素在生物化學科學中的得到越來越廣泛應用。
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Matthew Steinhauser, MD
Brigham and Women’s Hospital
Harvard Medical School